新手在進(jìn)行純化水微生物限度檢查時(shí)很多步驟不是特別清楚，首先我們要熟悉藥典，了解清楚才能剛好的做實(shí)驗(yàn)，清楚每個(gè)步驟，再來(lái)實(shí)際操作，中間有很多細(xì)節(jié)需要我們掌握。下面小編就來(lái)詳細(xì)介紹一下。

　　第一步:培養(yǎng)基配制

　　為了確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行，培養(yǎng)基的配制成為了首要任務(wù)。有兩種選擇可供選擇：一是直接購(gòu)買現(xiàn)成的培養(yǎng)基，省時(shí)省力;二是按照《中國(guó)藥典》的配方自行配制，這需要一定的技巧和耐心。在自行配制的過(guò)程中，由于未能及時(shí)攪拌，可能會(huì)導(dǎo)致燒杯在加熱時(shí)炸裂，因此認(rèn)真閱讀說(shuō)明書和細(xì)心觀察加熱過(guò)程至關(guān)重要。

　　第二步:全面滅菌，確保無(wú)菌環(huán)境

　　配制好的培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)所需的各種器具都需要進(jìn)行滅菌處理，以確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的無(wú)菌。在滅菌前，應(yīng)充分考慮實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能用到的器具，如移液管、濾膜、剪刀和鑷子等，并逐一進(jìn)行滅菌處理。

　　滅菌時(shí)，要多考慮一些，試驗(yàn)的時(shí)候會(huì)用到什么器具?比如:

　?、偎幍湟?guī)定取本品不少于1ml，是不是要準(zhǔn)備1ml的移液管或者移液槍?

　?、跒V膜是不是要滅菌?

　　③試驗(yàn)過(guò)程是不是需要剪刀、鑷子等。

　　第三步:倒平皿.

　　滅菌結(jié)束，就可以進(jìn)入微生物限度室(提前打掃衛(wèi)生、消毒)進(jìn)行培養(yǎng)基分裝了:置直徑90mm的無(wú)菌平皿中，注入15~20ml溫度不超過(guò)45C溶化的R2A瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置，靜待使用。

　　第四步:實(shí)驗(yàn)

　　無(wú)論是采用微生物限度儀還是傳統(tǒng)的玻璃過(guò)濾器，其相關(guān)配件(如濾杯、底座等)都要提前滅菌。純化水微生物限度的檢測(cè)過(guò)程，整體比較簡(jiǎn)單:取1ml純化水，混合至含不少于100ml(一般都選100ml;也有企業(yè):取2ml純化水混合至198ml,分兩次過(guò)濾)適宜稀釋液(pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液)的無(wú)菌容器中，混勻，立即過(guò)濾，菌面朝上貼于培養(yǎng)基上。

　　第五步:培養(yǎng)

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，按照《中國(guó)藥典》的要求，將培養(yǎng)皿放置在適宜的溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。耐心等待至少5天，期間不斷觀察微生物的生長(zhǎng)情況，并做好記錄。

　　第六步:查看空白對(duì)照平皿

　　最后一步是查看空白對(duì)照平皿，以排除實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的干擾因素。仔細(xì)觀察對(duì)照平皿中的微生物生長(zhǎng)情況，并與實(shí)驗(yàn)平皿進(jìn)行對(duì)比和分析。這一過(guò)程雖然短暫，但卻是對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的一次全面檢驗(yàn)和總結(jié)。

　　臺(tái)上三分鐘，臺(tái)下十年功。真正在超凈工作臺(tái)進(jìn)行薄膜過(guò)濾操作的過(guò)程，時(shí)間很短，但前處理時(shí)間很長(zhǎng)，要準(zhǔn)備的前期工作很雜，要心細(xì)，不能遺漏。通過(guò)這次實(shí)驗(yàn)，深刻體會(huì)到了微生物實(shí)驗(yàn)的復(fù)雜性和精細(xì)性。每一步操作都需要細(xì)心、耐心和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度，只有這樣才能確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。